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本產品僅供科研實驗，不得用于醫療或食用

南京信帆生物技術有限公司主營生物試劑和銷售---
大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒
此ELISA試劑盒的英文名稱是---
Rat phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA kit
規格：	96T/48T
我們的elisa試劑盒具有如下優點：

一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩定的重復性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型；
五、性價比非常好，節省實驗經費。
ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。自上世紀70年代初問世以來，發展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學和醫學科學的許多領域。
大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒
Rat phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA kit
ELISA技術原理：以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底
物的高效催化作用相結合起來
1. 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
2. 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
3. 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。
4. 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。
5. 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
6. 加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復性好。
大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒
Rat phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA kit

我們采用的酶：		辣根過氧化酶（HRP）
1. HRP在蔬菜作物辣根中含量很高。
2. 是一種糖蛋白，含糖量約18％；分子量為44kD。
3. 是一種復合酶，由主酶（酶蛋白）和輔基（亞鐵血紅素）結合而成的一種卟啉蛋白質。
4. 主酶為無色糖蛋白，在275nm波長處有zui高吸收峰；輔基是深棕色的含鐵卟啉環，在403nm波長處有zui高吸收峰。
HRP催化下列反應：
DH2+H2O2<==HRP==>D+2H2O
上式中DH2為供氫體，H2O2為受氫體。HRP對受氫體的專一性很高，除H2O2外，僅作用于小分子醇的過氧化物和尿素的過氧化物。后者為固體，作為試劑較H2O2方便。許多化合物可作為HRP的供氫體，在ELISA中常用的供氫體底物為鄰苯二胺（orthopenylenediamine，OPD）、四甲基聯苯胺（3，3'， 5，5'-tetramethylbenzidine，TMB）和ABTS[2，2'-azino- bis(3-ethyl-benzthiazolinesulfonate-6)]。
大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒
Rat phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA kit
測定步驟
1.加樣
	1. 除包被外都需45度加樣
	2.加樣體積要準確
	3.管底加樣，不能加在管壁上
	4.加樣時不能產生氣泡
2.溫浴
	1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫度的水浴箱。
	2.各ELISA板不應疊在一起。
	3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕紗布的金屬濕盒中。
	4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
	1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻是決定實驗成敗的關鍵。
	2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或抗體結合的物質以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
	1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般可采用目視比色。
	2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質量和軟件的算法。
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