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TUNEL檢測
  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2019-12-10
  • 訪  問  量:1404
簡要描述:

TUNEL檢測
TUNLE即原位末端轉移酶標記技術。TUNEL是分子生物學與形態學相結合的研究方法,對完整的單個凋亡細胞核或凋亡小體進行原位染色,能準確的反應細胞凋亡典型的生物化學和形態特征,可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養的細胞和從組織中分離的細胞的細胞凋亡測定,并可檢測出極少量的凋亡細胞,靈敏度遠比一般的組織化學和生物化學測定法要高,因而在細胞凋亡的研究中已被廣泛采用。

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本產品僅供科研實驗,不得用于醫療或食用

TUNEL檢測

TUNEL檢測的原理: 

胞在發生凋亡時,會激活一些DNA內切酶,這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測,可以發現180-200bpDNA ladder。基因組DNA斷裂時,暴露的3-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素 (FITC) 標記的dUTP (fluorescein-dUTP) ,從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測,這就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法檢測細胞凋亡的原理。

TUNEL檢測(石蠟切片)

取下適當的新鮮的組織塊固定于4%-10%濃度的多聚甲醛或中性甲醛中,甲醛與組織塊體積比在10:120:1之間,4攝氏度保存運輸;

TUNEL檢測(冰凍切片)

取下的新鮮組織應立即放入超低溫冰箱或者液氮中,用干冰運輸,固定好的切片應于-80或者-20度保存,并盡快用于檢測;

TUNEL檢測(細胞爬片)

細胞爬片4%多聚甲醛4度固定30min,換PBS緩沖液4度保存運輸,盡快用于檢測;

 

熒光法需要先拍一張凋亡熒光圖,再拍一張原位染核圖,再合并圖層,終我們提供的為三張熒光圖片。

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