總膽固醇(T-CHO)試劑盒樣本處理注意事項(xiàng)


血清總膽固醇（Total Cholesterol，TC）是指血液中所有脂蛋白所含膽固醇的總和，包括游離膽固醇和膽固醇酯。人體的膽固醇除來自食物外，還可在體內(nèi)由乙酰輔酶A合成，成人肝臟和小腸可提供約90%的內(nèi)源性膽固醇。血清總膽固醇水平受年齡、家族、性別、遺傳、飲食、精神等多種因素的影響，男性高于女性，體力勞動(dòng)者低于腦力勞動(dòng)者。由于血清總膽固醇與動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病、腦卒中等心腦血管疾病關(guān)系密切，血清總膽固醇測(cè)定已成為血脂分析的常規(guī)項(xiàng)目。


本試劑盒采用 COD-PAP 法配制，用于體外測(cè)定總膽固醇含量。適用于各型酶標(biāo)儀、半自動(dòng)或 全自動(dòng)生化分析儀。

 

樣本處理:

血清(漿)：直接測(cè)定，如超過線性范圍用生理鹽水稀釋后測(cè)定。

培養(yǎng)液樣本：吸取培養(yǎng)液，1000 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，取上清測(cè)定。

[注]：一般建議細(xì)胞密度在 100 萬(wàn)個(gè)/ml 以上。

組織樣本：準(zhǔn)確稱取組織重量，按重量(g):體積(ml)=1:9的比例，加入9 倍體積的勻漿介 質(zhì)，冰水浴條件下機(jī)械勻漿，2500 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，取上清液待測(cè)。

[注]:
1、如組織樣本不存在高脂樣本，勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用磷酸鹽緩沖液(0.1mol/L pH 7.4)或生理鹽水進(jìn)行提取。 
2、如組織樣本為高脂樣本或部分為高脂樣本，勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用無水乙醇進(jìn)行提取。

總膽固醇(T-CHO)試劑盒樣本處理注意事項(xiàng)


細(xì)胞樣本：

A、細(xì)胞收集:將制備好的細(xì)胞懸液取出，1000 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，棄上清液，留細(xì)胞沉淀；用等滲緩沖液（推薦 0.1mol/L、pH7～7.4 磷酸鹽緩沖液）清洗 1～2 次，同樣 1000 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，棄上清液，留細(xì)胞沉淀；

B、細(xì)胞破碎:加入 0.2～0.3ml 的勻漿介質(zhì)（推薦 0.1mol/L、pH7～7.4 磷酸鹽緩沖液或生理 鹽水）進(jìn)行勻漿，冰水浴條件下超聲破碎(功率 300W，3～5 秒/次，間隔 30 秒,重復(fù) 3～5 次 ) 或手 動(dòng)勻漿， 制 備好的勻 漿 液不離心 待 測(cè)。也可 采 用裂解液 裂 解 ( 推薦 TritonX-100,1～2%,裂解 30～40 分鐘)，裂解好的液體不離心直接測(cè)定。 

注意事項(xiàng)：

1、本產(chǎn)品僅用于科研，不得用于臨床診斷，切勿服用。

2、樣品含量如超出檢測(cè)范圍上*，可用生理鹽水稀釋樣本后進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

3、試劑防止葡萄糖、膽固醇等試劑的污染。

4、試劑與樣本量可按照全自動(dòng)生化分析儀的要求，按照 1：100 的比例減。

總膽固醇(T-CHO)試劑盒樣本處理注意事項(xiàng)