性激素6项实验检测,放射免疫实验检测,明胶酶谱试剂盒,科研用人血清,质控标品,试剂盒-南京信帆生物技术有限公司

技術文章/ ARTICLE

我的位置:首頁  >  技術文章  >  上海信帆生物:溶血空斑試驗

上海信帆生物:溶血空斑試驗

更新時間:2016-05-07      瀏覽次數:1651

血空斑試驗 (plaque forming cell assay , PFC) 是 Jerne 于 1963 年設計的用于體外檢查和計數某種抗體形成細胞的一種方法。該方法是將 SRBC 免疫動物,隨后取其脾制成淋巴細胞懸液與高濃度的 SRBC 混合后加入瓊脂凝膠中,其中每個釋放溶血性抗體的細胞可致敏其周圍的 SRBC ,當加入補體時,致敏的 SRBC 被溶解而形成了局部的溶血空斑,每一個空斑代表一個抗體形成細胞。本實驗采用玻片法。 
 【材料】 
 1. 動物,小白鼠,體重 18 — 22g 。 
 2. 補體,脈鼠新鮮血清(用前須經 SRBC 吸收: 1ml 壓積 SRBC 加 20ml 補體,置 4 ℃ 20 分鐘,離心,取上清,用 hanks 液稀釋為 1 : 10 )。 
 3 .主要試劑:瓊脂(表層基 0.7% ,底層基 1.4% ,用 Hanks 配制)、用 Hanks 配制的 20%SRBC 、 DEAE 葡聚糖溶液(右旋糖酐) (10mg / m1) 。 
 4. 載玻片。 
 5 .儀器設備 37 ℃ 恒溫箱、 解剖 顯微鏡 。 
 【方法】 
 1. 小鼠免疫及脾細胞懸液的制備 
 (1) 以 4 × 10 8 / m1SRBC 免疫小鼠, 4 天后取出免疫和對照小鼠的脾。 
 (2) 稱重后置含冷 Hanks 的培養皿中,將脾在 l00 目不銹鋼網上研磨后,再經 200 目不銹鋼網過濾,然后將細胞收集于刻度離心管中 ( 將試管置冰浴中 ) 。 
 (3) 用 Hanks 懸浮細胞,調細胞濃度到 2 × l0 6 / m1 。 
 2 .瓊脂凝膠板的制備 
 (1) 預熱底層瓊脂,倒 4ml 于載玻片上,待凝。 
 (2) 將底層基載玻片和所有試劑(除脾細胞)預溫 40 ℃ 左右。 
 (3) 在表層瓊脂中加入牛胎血清、右旋糖酐、 20%SRBC 和脾細胞懸液各 0.1ml ,然后傾注入鋪有底層基的載玻片上,凝固后于 37 ℃ 孵育 1 小時。然后加 1.0ml 補體,再次孵育 30 分鐘。用放大鏡或肉眼或顯微鏡觀察溶血空斑,并計數。 
 【結果觀察】 
 將平皿置解剖顯微鏡下計數空斑數。一般計算 4 塊載玻片上的空斑均數,也可分別計數每塊載玻片的空斑數,計算出每組動物每 100 萬個脾細胞中含空斑形成細胞的平均值 ( 圖 8-1) 。 
 【注意事項】 

 1. 一般選用純系小鼠。 
 2.在加入細胞之前,瓊脂平板制備時要使瓊脂*溶解,加入脾細胞時應檢查是否充分均勻分布,因一時性的冷激會導致形成小的凝膠灶,造成觀察和判斷困難。 
 3.注意防止瓊脂泡沫的出現。 
 4 .摘除的脾不宜立即放入冰浴中的液體中,可顯著降低空斑計數。 

圖 8-1 溶血空斑試驗 
  通過混合檢測細胞和抗原致敏羊紅細胞來測定抗體形成細胞。通過孵育,圍繞羊紅細胞的細胞分泌抗體,羊紅細胞由抗體包被,然后加入補體,羊紅細胞即被裂解。右圖顯示一個 B 細胞位于空斑中央。

elisa試劑盒,elisa kit,IL-2 elisa試劑盒,IL-6 elisa試劑盒,IL-10 elisa試劑盒,TNF-a試劑盒,酶聯免疫分析試劑盒,人血清,鹽酸鹽,試劑盒-南京信帆生物技術有限公司 

主站蜘蛛池模板: 金酱酒_金酱酒代理加盟招商_OEM贴牌企业定制! – 金酱酒代理加盟!茅台镇较早的酿酒烧坊,年产优质酱香白酒5000余吨,仁怀市十强白酒企业,主营主品:金酱酒、金酱陈香酒、酱香老酒等系列品牌产品 | 小地磅,钢瓶秤,叉车称,轮椅秤,倒桶秤,畜牧秤,轴重仪,称重模块——上海实干实业有限公司-网站首页 | 普利塞HS穿刺活检针-巴德穿刺活检针-美创爱琅Argon活检针同轴针-山东瑞玺源 | 直流屏|青岛直流屏|直流屏电池-世界500强艾默生直流屏标准生产厂家赛里斯能源科技有限公司 | 培训桌-培训椅-会议椅-洽谈桌-培训桌椅生产厂家-【鼎优家具】 | 宿州电机维修厂家,大型电机维修及二手电机修理到安徽鑫瑞特电机装备有限公司 | 上饶建盛建设,建盛建设,上饶市建盛建设工程质量检测有限公司-房屋鉴定 | 山东茶之恋杯业有限公司| 箱式电炉,箱式烧结炉,箱式马弗炉,箱式实验炉,高温箱式电阻炉,箱式加热炉,箱式退火炉,箱式真空气氛炉洛阳研博炉业有限公司 | 暨南大学穗华口腔医院【官网】 | 上海乾乙智能科技有限公司官网 | 太原塑料托盘,塑料筐,塑料箱,塑料垃圾桶_太原都程塑料制品有限公司 | 石膏砂浆生产线_特种砂浆生产线_轻质抹灰石膏设备-青岛环港重工科技有限公司 | 深圳市碧源达科技有限公司| 长焦监控摄像机-热成像夜视仪-激光云台-深圳红阳信息科技有限公司 | 华网,华网资讯,华网头条,华人网络家园 | 影像测量仪|检测设备定制|平面度测量仪|三坐标测量机|广州市海科思自动化设备有限公司-400-0528-668 | 组合式空调机组-吊顶式新风换气机-消防高温排烟风机-德州宏楚空调设备有限公司 | 威海电子电镀,山东五金电镀,威海镀镍,山东镀铜镍铬-威海鑫镱金属制品厂 | 氧化膜测厚仪-瓶壁测厚仪-QNIX菲尼克斯膜厚仪-深圳市时代之峰科技有限公司 | 阴_阳离子聚丙烯酰胺价格_聚合氯化铝厂家_聚合硫酸铁-巩义市亿洋水处理材料有限公司 | 投影仪配件,苏州投影仪维修,B60数显表维修-苏州市加野仪器有限公司 | 混凝土修补-清水混凝土保护剂-仿清水混凝土-混凝土装修-混凝土色差处理-混凝土色差修复剂-德州唐荣建筑装饰工程有限公司 | 河南电梯公司_郑州电梯公司_河南家用别墅电梯厂家-郑州嘉祥机电设备公司 | 线宽测试仪丨光调制分析仪丨调制器 卓越光子-专注于光电解决方案 | 社会百态,七仙女思春完整版免费高清电影引发的思考 | 装备升级改造I成都星迅通科技有限公司-成都星迅通科技有限公司官方网站 | 饮料瓶-白酒瓶-绿色玻璃瓶-山东玻璃瓶厂家-枣庄市金泰玻璃有限公司 | 在线腐蚀率仪,在线污垢热阻仪,靶式光源仪-北京同德创业科技有限公司 | 湖南实验台-防静电工作台-实验设备厂家-长沙实验室设备有限公司-湖南贝塔实验室设备有限公司 | 煤炭烘干机|煤泥烘干机|矿泥烘干机|酒糟烘干机|果渣烘干机-东鼎干燥官方网站 | 首页-南德电气集团-电能质量产品解决方案|能源数字化系统解决方案|新能源检测评估服务|电力/光伏/储能EPC工程总承包 | 物流系统?货代系统?国际快递/专线/小包系统首选?哲盟软件 | 亚洲一区日韩一区欧美一区a,中文字幕乱妇无码AV在线,欧美日韩免费在线观看,国产精品一区二区三区免费,日韩精品免费一线在线观看,日韩一本在线,国产呦精品一区二区三区下载,国产日韩精品一区二区在线观看,欧美日韩高清一区二区三区,日韩在线免费观看视频,欧美日韩一区在线观看 | 苏州涂附磨具厂家-陶瓷磨具-树脂磨具批发-苏州磨料磨具-苏州远东砂轮有限公司 | 气象站_校园气象站_自动气象站_光伏气象站-山东万象环境科技有限公司 | 驾驶扫地机-手推洗地机-吸尘器-清洁设备厂家-荣事达官网 | 郑州四棉纺织有限公司-现代化纺织企业 | 商标注册_北京商标注册费用_申请商标注册代理机构_北京商标注册公司- | 泊头市天一泵业有限公司_齿轮泵,高粘度齿轮泵,螺杆泵,三螺杆泵 | 长春网站优化,网络推广,seo快速排名,1.8元/词/天-同信长春网络公司 |